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當前位置:首頁產品中心生化檢測試劑盒-常量法土壤系列BC0155-100T/48S土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測試劑盒

土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測試劑盒
產品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測試劑盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
Soil Cellulase(S-CL) Activity Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規格
100T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網站說明書

產品型號:BC0155-100T/48S

更新時間:2025-08-29

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :1531

服務熱線

010-50973130

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產品介紹

土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC0155
規格:100T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱規格保存條件
試劑一液體2.5 mL×1瓶(自備)2-8℃保存
試劑二液體5 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體20 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四液體6 mL×1瓶2-8℃保存
標準品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:


產品說明:
S-CL主要來源于土壤微生物,S-CL催化農作物秸稈產生的葡萄糖是主要的碳源營養物質。本產品采用3,5-二硝基水楊酸法測定S-CL催化纖維素降解產生的還原糖的含量。




注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30~50目篩、研缽、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30~50目篩。
二、測定步驟
  1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至540nm,分光光度計蒸餾水調零。

  2. 標準品準備:將標準品用蒸餾水稀釋至1、0.80.60.40.20.1mg/mL

  3. 標準品稀釋表:

序號稀釋前濃度(mg/mL)標準液體積(µL)蒸餾水體積(µL)稀釋后濃度(mg/mL)
1101009001
21160400.8
31120800.6
41801200.4
51401600.2
61201800.1
試驗中每個標準管需15µL標準溶液
4、操作表(在EP管中依次加入下列試劑)

對照管測定管標準管空白管
風干土樣(g)0.050.05--
試劑一(μL2525--

煮沸15min(蓋緊)振蕩混勻,室溫放置15min--
試劑二(μL4545--
試劑三(μL185185--
蒸餾水(μL4545--
振蕩混勻,40℃水浴糖化1h 后,煮沸15min(蓋緊,防止水分散失),10000rpm常溫離心10min,取上清得糖化液。--
糖化液(μL1515--
標準液(μL--15-
蒸餾水(μL---15
試劑四(μL35353535
混勻, 沸水浴中煮沸顯色15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻
蒸餾水(μL250250250250
混勻,冷卻后,取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中,測定540nm下吸光值A分別記為A對照管、A測定管、A標準管、A空白管。計算ΔA測定=A測定管-A對照管ΔA標準=A標準管-A空白管。每個測定管設定一個對照管。空白管和標準曲線只需做1-2次。
三、S-CL酶活計算
1、標準曲線的建立:
標準溶液濃度(y)為縱坐標,吸光度ΔA標準(x)為橫坐標建立標準曲線y=kx+b。根據標準曲線,將ΔA測定帶入公式中(x)計算樣本濃度ymg/mL)。
2、S-CL酶活計算:
單位的定義:每天每g土樣中產生1mg葡萄糖定義為一個酶活力單位。
S-CL酶活(U/g 土樣)=y×V反總÷W÷T =144×y
T:反應時間,1h=1/24dV反總:反應體系總體積,0.3mLW:樣本質量,0.05g
注意事項:
若樣本測定管吸光度過小(0.02),可延長反應時間,即40℃水浴糖化時間,最后計算時加以換算即可。
參考文獻:
  1. Deng S P, Tabatabai M A. Cellulase activity of soils[J]. Soil Biology and Biochemistry, 1994, 26(10): 1347-1354.

  2. Sinegani A A S, Sinegani M S. The effects of carbonates removal on adsorption, immobilization and activity of cellulase in a calcareous soil[J]. Geoderma, 2012, 173: 145-151.

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