α-淀*酶（α-AL）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC0615
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：若有黃色晶體析出，需加熱溶解后再用；

2. 試劑二：臨用前取1支試劑三加入1瓶試劑二中，置于常溫水中并加熱至煮沸，期間不斷攪拌粉劑至溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；

3. 標準品：10 mg無水*萄糖。臨用前加1 mL蒸餾水，配成10 mg/mL葡萄糖標準液，2-8℃保存2周。

產品說明：
淀粉水解酶，包括α-淀*酶和β-淀*酶。α-AL (EC 3.2.1.1)隨機催化淀粉中α-1,4-糖苷鍵水解，生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖，同時使淀粉的粘度降低，因此又稱為液化酶。
淀粉水解酶催化淀粉水解生成還原糖，還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質，在540nm有吸收峰；通過測定540nm吸光度增加速率，計算淀*酶活性。α-AL耐熱，但是β-淀*酶可在70℃鈍化15min。因此粗酶液經過70℃鈍化15min，就只有α-AL能夠催化淀粉水解。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
酶標儀/可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、96孔板/微量玻璃比色皿、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
測定的吸光值大于1.5時，可以對樣本進行適當稀釋后測定。若吸光值過小，可以濃縮淀*酶稀釋液或者淀*酶原液。注意同步修改計算公式。
相關發表文獻：

1. Yu Z, Yang Z, da Silva J A T, et al. Influence of low temperature on physiology and bioactivity of postharvest Dendrobium officinale stems[J]. Postharvest biology and technology, 2019, 148: 97-106.

2. Chen M X, Zhu F Y, Wang F Z, et al. Alternative splicing and translation play important roles in hypoxic germination in rice[J]. Journal of experimental botany, 2019, 70(3): 817-833.

3. QinYuan,ShangLin,YuanFu,et al. Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus). International Journal of Biological Macromolecules. November 2018;(IF3.909)

參考文獻：

1. Hashemi M, Mousavi S M, Razavi S H, et al. Comparison of submerged and solid state fermentation systems effects on the catalytic activity of Bacillus sp. KR-8104 α-amylase at different pH and temperatures[J]. Industrial crops and products, 2013, 43: 661-667.

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