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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC3050-50T/48S
更新時間：2024-04-22
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1070
010-50973130
產品分類
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土壤全鈦含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC3050
規格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
溶液配制：
1、 提取液：自備試劑，臨用前根據實驗所需量按照濃鹽酸（mL）：蒸餾水（mL）=1:1的比例進行配制，現用現配，常溫保存。大約需要500mL。
2、 試劑二：臨用前加入16mL蒸餾水，充分溶解；用不完的試劑2-8℃保存4周。
3、 標準品：10μmol/mL鈦標準液。
產品說明：
鈦是自然界廣泛存在的過渡金屬元素，與鐵元素緊密共生，二者存在一定的相關性，土壤中鈦對植物有極其重要的生理作用，充足的鈦可保證植物結實率提高，空癟率減少，并增強植物的抗害效果。
在酸性條件下，二安替比*甲烷與鈦離子生成黃色絡合物，在390nm處有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內與鈦離子濃度成正比。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、天平、馬弗爐、坩堝、坩堝鉗、臺式離心機、水浴鍋、研缽、100目篩、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、濃鹽酸（37%）、蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
1、取新鮮土樣烘干，過100目篩；
2、按照土壤質量（g）：試劑一質量（g）為 1：5的比例（建議稱取約0.1g土樣，加入0.5g試劑一）緩慢加入試劑一于坩堝中，邊加邊攪拌均勻；
3、然后在馬弗爐中900℃熔融30min；
4、趁熱取出坩堝，加入10mL提取液溶解熔塊，必要時加蓋，防止溶液濺出，至溶解全；
5、最后10000g，25℃離心10min，取上清液待測。
二、測定步驟
1、 可見分光光度計預熱30min以上，調節波長至390nm，蒸餾水調零。
2、 標準品的稀釋：臨用前按下表將標準品用蒸餾水稀釋為5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078125、0.0390625μmol/mL的標準品待測。
3、 標準品稀釋表：
序號 | 稀釋前濃度（μmol/mL） | 標準液體積（μL） | 蒸餾水體積（μL） | 稀釋后濃度（μmol/mL） |
1 | 10 | 300 | 300 | 5 |
2 | 5 | 300 | 300 | 2.5 |
3 | 2.5 | 300 | 300 | 1.25 |
4 | 1.25 | 300 | 300 | 0.625 |
5 | 0.625 | 300 | 300 | 0.3125 |
6 | 0.3125 | 300 | 300 | 0.15625 |
7 | 0.15625 | 300 | 300 | 0.078125 |
8 | 0.078125 | 300 | 300 | 0.0390625 |
每管需要200μL。
4、 操作表：（在1.5mLEP管中依次加入下列試劑）
試劑名稱（μL） | 測定管 | 空白管 | 標準管 |
樣本 | 200 | - | - |
蒸餾水 | - | 200 | - |
標準品 | - | - | 200 |
試劑二 | 200 | 200 | 200 |
提取液 | 200 | 200 | 200 |
試劑三 | 400 | 400 | 400 |
渦旋混勻，置于25℃環境中準確反應30min后，于1mL玻璃比色皿中測定390nm處吸光值A，記為A測定、A空白、A標準，計算ΔA測定=A測定-A空白，ΔA標準=A標準-A空白。空白管和標準曲線只需測1-2次。 | |||
三、土壤全鈦含量的計算
1、 標準曲線的繪制
根據標準管的濃度（x，μmol/mL）和吸光度ΔA標準（y，ΔA標準），建立標準曲線y=kx+b。根據標準曲線，將ΔA測定（y，ΔA測定）帶入公式計算樣本濃度（x，μmol/mL）
2、土壤全鈦含量計算
全鈦含量（mg/kg）= x ×V樣×47.867÷1000÷（W÷1000×V樣÷V樣總）
= 478.67x÷W
V樣：反應體系中加入樣本體積，0.2mL；V樣總：加入提取液體積，10mL；W：樣本質量，g；47.867：Ti原子量；第一個1000：單位換算1ug=10-3 mg；第二個1000：單位換算，1g=10-3kg。
注意事項：
如果測得吸光值ΔA＞1.7，建議客戶將樣本上清液用蒸餾水稀釋后重新測定，注意計算公式乘上稀釋倍數；如果測得吸光值過低或接近空白值，建議客戶加大樣本量后重新測定，注意同步修改計算公式。
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