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專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC5600-50T/48S
更新時間：2024-04-22
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：985
010-50973130
產(chǎn)品分類
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高鐵血紅蛋白（MetHb）含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC5600
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體50mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體60mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加入1mL蒸餾水充分溶解，即為10mg/mL血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，2-8℃可保存4周。
2. 0.625 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)品配制：取50μL 10mg/mL血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，加入750μL蒸餾水，充分混勻，配制成0.625mg/mL的血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品使用，現(xiàn)配現(xiàn)用。
產(chǎn)品說明：
高鐵血紅蛋白（Methemoglobin，MetHb）為血紅蛋白的氧化物，是血紅蛋白分子內(nèi)的亞鐵離子被氧化成三價鐵離子形成的。血紅蛋白具有攜氧能力，氧化后的高鐵血紅蛋白失去攜氧能力，測定高鐵血紅蛋白含量可以衡量血液及紅細(xì)胞代用品攜氧能力，其測定方法對臨床診斷高鐵血紅蛋白血癥和研制紅細(xì)胞代用品具有重要意義。
血紅蛋白與氧結(jié)合形成氧合血紅蛋白，脫氧后為脫氧血紅蛋白，分別測定氧合血紅蛋白、脫氧血紅蛋白和高鐵血紅蛋白在560nm、576nm、630nm處的吸光值，利用各組分在特定波長的消光系數(shù)，可計算各組分的質(zhì)量濃度百分比，再測出樣本的總血紅蛋白含量，即可計算得到樣本的高鐵血紅蛋白含量。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
1. 如果A總大于1.0，建議將樣本用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測定，計算公式中注意同步修改。
2. 如果A總小于0.01或接近空白管吸光值，可適當(dāng)增大樣本量，空白管和標(biāo)準(zhǔn)管也需要進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1. 將兔紅細(xì)胞，用蒸餾水稀釋100倍后測定總血紅蛋白含量，不稀釋直接測定A560、A576、A630，用1mL玻璃比色皿測得并計算ΔA總=A總-A空白=0.537-0.007 =0.530，ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.369-0.007=0.362；A560=0.741，A576=1.218，A630=0.104；計算：
（1）總血紅蛋白含量（mg/mL）= 0.625×ΔA總÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×F=91.51 mg/mL
（2）MetHb（%）=0.2380÷（0.2380+0.6509+0.0329）×100%=25.82%
（3）高鐵血紅蛋白含量（mg/mL）=總血紅蛋白含量×MetHb（%）=23.627mg/mL
2. 將兔全血，用蒸餾水稀釋160倍后測定總血紅蛋白含量，不稀釋直接測定A560、A576、A630，用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA總=A總-A空白= 0.570-0.007 =0.563，ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.369-0.007=0.362；A560=1.111，A576=1.650，A630=0.072，計算：
（1）總血紅蛋白含量（mg/mL）= 0.625×ΔA總÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×F=155.525 mg/mL
（2）MetHb（%）=0.084÷（0.2402+0.8292+0.0840）×100%=7.283%
（3）高鐵血紅蛋白含量（mg/mL）=總血紅蛋白含量×MetHb（%）=11.33mg/mL
3. 將小鼠全血，用蒸餾水稀釋160倍后測定總血紅蛋白含量，不稀釋直接測定A560、A576、A630，用1mL玻璃比色皿測得并計算ΔA總=A總-A空白= 0.787-0.007=0.780，ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.369-0.007=0.362；A560=1.518，A576=1.821，A630=0.373，計算：
（1）總血紅蛋白含量（mg/mL）= 0.625×ΔA總÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×F=215.47 mg/mL
（2）MetHb（%）=0.8201÷（0.4564+0.5931+0.8201）×100%=43.86%
（3）高鐵血紅蛋白含量（mg/mL）=總血紅蛋白含量×MetHb（%）=95.51mg/mL
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