植物蔗糖酶檢測試劑盒微量法

產品簡介：

儲存條件
2-8℃
植物蔗糖酶檢測試劑盒微量法
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Plant Invertase Activity Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規格
100T/48S

產品型號：BC0135-100T/48S

更新時間：2024-04-12

廠商性質：生產廠家

訪問量：828

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生化檢測試劑盒-微量法

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產品介紹

植物蔗糖酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號: BC0135
規格: 100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
提取液	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體2 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1支	2-8℃保存
試劑三	液體4 mL×1瓶	常溫保存
標準品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：用時加入1 mL蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑 2-8℃保存一周；
標準品：用時加入1 mL蒸餾水充分溶解，制備10 mg/mL葡萄糖標準溶液待用；用不完的試劑2-8℃保存一周。

產品說明：
蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關鍵酶之一，能夠水解蔗糖變成相應的單糖而被機體吸收。
本試劑盒采用3,5-二硝基水楊酸法測定蔗糖酶催化產生的還原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3,5-二硝基水楊酸與還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內還原糖的量和反應液的顏色深度成正比。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
二、測定步驟
1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 540nm，蒸餾水調零。
2、標準品的制備：
將標準品用蒸餾水稀釋至2.5、2、1.5、1、0.8、0.6、0.4、0.2、0mg/mL（0mg/mL為空白管）。
3、加樣表（在EP管中依次加入下列試劑）：

試劑名稱（μL）	對照管	測定管	標準管
試劑一	15	15	15
蒸餾水	15	-	-

樣本	30	30	-
標準品	-	-	30
試劑二	-	15	15
置于25℃準確水浴 10min
試劑三	30	30	30
混勻，100℃水浴 10min 左右（蓋緊，防止水分散失），冷卻至室溫
蒸餾水	210	210	210

混勻，取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中測定各管540nm吸光值，ΔA=A 測定管-A對照管。（每個測定管需設一個對照管）

注意事項：
當A大于1.2時，建議將樣本用提取液稀釋后進行測定。
參考文獻：

Karley A J, Ashford D A, Minto L M, et al. The significance of gut sucrase activity for osmoregulation in the pea aphid, Acyrthosiphon pisum[J]. Journal of insect physiology, 2005, 51(12): 1313-1319.

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