血清總鐵結合能力（TIBC）檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2865
規格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑四：臨用前根據用量將A液和B液按1:1混合；

2. 標準品：臨用前加0.9mL蒸餾水溶解，得到40μmol/mL FeSO₄溶液，2-8℃保存8周。

產品說明：
血清總鐵結合能力指血清轉鐵蛋白可結合鐵的能力，其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發生密切相關。
Fe²⁺與菲洛嗪反應形成紫紅色化合物，在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下，血清轉鐵蛋白可以與Fe³⁺結合，剩余未結合的Fe³⁺可以被還原成Fe²⁺，此時吸光度A1與未結合Fe³⁺數量正相關；酸化后，轉鐵蛋白結合的Fe³⁺釋放，并且進一步被還原成Fe²⁺，此時吸光度A2與總Fe³⁺數量正相關。A2減A1與TIBC呈正比。

技術指標：
低檢出限：第一次測量的檢出限為0.00098 μmol/mL；第二次測量的檢出限為0.0012 μmol/mL。
線性范圍：第一次測量的線性范圍為1.95×10^-3-0.5 μmol/mL；第二次測量的線性范圍為1.95×10^-3-0.5 μmol/mL。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋/恒溫培養箱、臺式離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、EP管、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
1. A1測小于0.1時，建議將樣本用蒸餾水適當稀釋再測定，注意計算公式里乘以稀釋倍數。
2. 試劑二、試劑四有一定的毒性，操作時請做好防護措施。
實驗實例：

1. 取40μL用蒸餾水稀釋2倍的駱駝血清，按照測定步驟操作，測得計算ΔA1測=A1測-A1空=0.342，ΔA1標=A1標-A1空=0.746，ΔA2測=A2測-A2空=0.735，ΔA2標=A2標-A2空=0.550，計算總鐵結合能力得：

總鐵結合能力TIBC（μmol/L）=500×（ΔA2測÷ΔA2標-ΔA1測÷ΔA1標）×2=877.919 μmol/L。

1. 取40μL用蒸餾水稀釋2倍的鵝血清，按照測定步驟操作，測得計算ΔA1測=A1測-A1空=0.191，ΔA1標=A1標-A1空=0.746，ΔA2測=A2測-A2空=0.732，ΔA2標=A2標-A2空=0.550，計算總鐵結合能力得：

總鐵結合能力TIBC（μmol/L）=500×（ΔA2測÷ΔA2標-ΔA1測÷ΔA1標）×2=1074.877 μmol/L。
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