脫氫抗壞血酸（DHA）含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC1245
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入5 mL蒸餾水充分溶解。溶解后可分裝保存于-20℃；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加入5.743 mL蒸餾水充分溶解，即為1 μmol/mL DHA，溶解后可分裝保存于-20℃。

產(chǎn)品說明：
AsA作為植物細(xì)胞一個重要生理指標(biāo)，其AsA的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA比率)及其合成與代謝相關(guān)酶類活性的變化涉及植物對一系列環(huán)境脅迫的響應(yīng)。DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物體內(nèi)，與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng)，具有電子受體的作用。
DTT還原DHA生成AsA，通過測定體系中AsA的生成速率，即可計算出DHA含量。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0016 μmol/mL
線性范圍：0.03125-3 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
低溫離心機、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔UV板、可調(diào)式移液器、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項：
正式實驗前做1~2個預(yù)實驗，如果ΔA大于1，建議將樣本用提取液進行稀釋后進行測定。
實驗實例：

1. 取0.1g紅葉石楠加提取液1 mL，冰上充分研磨，16000g 4℃離心20min，取上清液稀釋4倍后按照測定步驟操作，用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管=A4-A3=1.0792-1.0621=0.0171，ΔA標(biāo)準(zhǔn)管=A2-A1=0.4723-0.0746=0.3977，按樣本質(zhì)量計算含量得：DHA含量(µmol/g 質(zhì)量) =1×ΔA測定管÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)管÷W×4（稀釋倍數(shù)）=1.720 µmol/g 質(zhì)量。

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