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二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶檢測盒 微量法
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶檢測盒 微量法
有效期
6個月
單位

推薦
若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號YA0602
英文名稱
Rubisco-Bisphosphate Carboxylase/Oxygenase (Rubisco) Activity Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Micr

產(chǎn)品型號:BC0445-100T/96S

更新時間:2025-08-26

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1947

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產(chǎn)品介紹

二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作
貨號:BC0445
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體25 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×1-20℃保存
試劑三粉劑×2-20℃保存
試劑四粉劑×1-20℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑三:臨用前加入0.5 mL蒸餾水充分溶解待用,振蕩溶解后若出現(xiàn)渾濁可以離心使用

  2. 試劑四:臨用前加入1 mL 蒸餾水充分溶解待用;

  3. 工作液的配制:臨用前在試劑二中加入全部試劑一,充分混勻,在25℃孵育5min

產(chǎn)品說明:
1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(Rubisco, EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一個關(guān)鍵酶,既控制著CO2的固定,同時又制約著碳素向Calvin循環(huán)和光呼吸循環(huán)分流,其活性的大小直接影響著光合速率。
在Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)與1分子的CO2結(jié)合,產(chǎn)生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA);PGA可通過外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶的作用,產(chǎn)生甘油醛-3-磷酸,伴隨著NADH氧化生成NAD+;在340 nm NADH有特征吸收峰,而NAD+沒有此吸收峰,因此測定340nm吸光度下降速率可以代表Rubisco的羧化酶活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測

自備的儀器和用品
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96UV板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水

操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

實驗實例:
  1. 取0.1g植物葉片,加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清之后按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管= A1測定-A2測定=1.2647-1.1825=0.0822ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.8649-0.8502=0.0147ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0822-0.0147=0.0675,按樣本質(zhì)量計算酶活得

Rubisco活力(U/g 質(zhì)量)=344×ΔA÷W=344×0.0675÷0.1=232.2 U/g 質(zhì)量。

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二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶檢測盒 微量法 二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶檢測盒 微量法

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