氨基酸（AA）含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號: BC1575
規格: 100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑三：臨用前加入0.8 mL無水乙醇，充分溶解，再加入11.2 mL蒸餾水混勻，2-8℃避光保存4 周。

2. 試劑四：臨用前加入1.66 mL蒸餾水，充分溶解，2-8℃可保存4周。

3. 標準品：10 μmol/mL 谷*酸標準液；

4. 1.25 μmol/mL谷*酸標準溶液：臨用前取100μL 10 μmol/mL谷*酸標準溶液，加入700 μL蒸餾水，充分混勻，得到1.25 μmol/mL谷*酸標準溶液，現用現配。

產品說明：
動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官，故尿中氨基酸的變化最能反應肝、腎的生理狀態。另外，氨基酸還能反應灼傷、傷寒等方面情況。植物體內氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發育時期氮代謝變化、植物對氮素的吸收、運輸、同化及營養狀況等有重要意義。
氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應，產生藍紫色化合物，在570nm有特征吸收峰；通過測定570nm吸光度，來計算氨基酸含量。


注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、無水乙醇（99%AR）、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件氨基酸含量（μmol/mL）=2.5×ΔA測定管÷ΔA標準管×F =6.063 μmol/mL。
相關發表文獻：

1. Li Z, Wang R, Gao Y, et al. The Arabidopsis CPSF30‐L gene plays an essential role in nitrate signaling and regulates the nitrate transceptor gene NRT 1.1[J]. New Phytologist, 2017, 216(4): 1205-1222.

2. Wang C, Zhang W, Li Z, et al. FIP1 plays an important role in nitrate signaling and regulates CIPK8 and CIPK23 expression in Arabidopsis[J]. Frontiers in plant science, 2018, 9: 593.

3. Wang N, Zhang X, Wang S, et al. Structural characterisation and immunomodulatory activity of polysaccharides from white asparagus skin[J]. Carbohydrate polymers, 2020, 227: 115314.

參考文獻：

1. Lee S W, Lim J M, Bhoo S H, et al. Colorimetric determination of amino acids using genipin from Gardenia jasminoides[J]. Analytica chimica acta, 2003, 480(2): 267-274.

2. Kalant H. Colorimetric Ninhydrin Reaction for Measurement of α-Amino Nitrogen[J]. Analytical Chemistry, 1956, 28(2): 265-266.

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