本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠促性腺激素（GTH）水平。用純化的小鼠促性腺激素（GTH）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入促性腺激素（GTH），再與HRP 標記的促性腺激素（GTH）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促性腺激素（GTH）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中小鼠促性腺激素（GTH）濃度。

4 樣品稀釋液 3ml×1 瓶 10 說明書 1 份

5 顯色劑A 液 3ml×1 瓶 11 封板膜 2 張

6 顯色劑B 液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1 個

160ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

80ng/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

40ng/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

20ng/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

10ng/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

4. 配液：將20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水20 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復5 次，拍干。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止后15 分鐘以內(nèi)進行。

計算以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

2．有效期：6 個月